Mais pourquoi le site d'épissage proximal fait du VEGF pro-angiogénique et le distal anti-angiogénique, c'est quoi qui cause cette différence ?
Isoforms

There are multiple isoforms of VEGF-A that result from alternative splicing of mRNA from a single, 8- exon VEGFA gene. These are classified into two groups which are referred to according to their terminal exon (exon 8) splice site: the proximal splice site (denoted VEGF) or distal splice site (VEGF b). In addition, alternate splicing of exon 6 and 7 alters their heparin -binding affinity and amino acid number (in humans: VEGF, VEGF b, VEGF, VEGF, VEGF b, VEGF, VEGF; the rodent orthologs of these proteins contain one fewer amino acids). These domains have important functional consequences for the VEGF splice variants, as the terminal (exon 8) splice site determines whether the proteins are pro-angiogenic (proximal splice site, expressed during angiogenesis) or anti-angiogenic (distal splice site, expressed in normal tissues). In addition, inclusion or exclusion of exons 6 and 7 mediate interactions with heparan sulfate proteoglycans (HSPGs) and neuropilin co-receptors on the cell surface, enhancing their ability to bind and activate the VEGF receptors (VEGFRs). Recently, VEGF-C has been shown to be an important inducer of neurogenesis in the murine subventricular zone, without exerting angiogenic effects.
La production de VEGF-A peut être induite dans une cellule qui ne reçoit pas suffisamment d'oxygène. Lorsqu'une cellule est déficiente en oxygène, elle produit HIF, facteur d'induction de l'hypoxie, un facteur de transcription. HIF stimule la libération de VEGF-A, entre autres fonctions (notamment la modulation de l'érythropoïèse). Le VEGF-A circulant se lie ensuite aux récepteurs VEGF sur les cellules endothéliales, déclenchant une voie de kinase tyrosine menant à l'angiogenèse. L'expression de l'angiopoïétine-2 en l'absence de VEGF conduit à la mort des cellules endothéliales et à la régression vasculaire. Inversement, une étude allemande menée in vivo a révélé que les concentrations de VEGF diminuaient en fait après une réduction de 25 % de l'apport d'oxygène pendant 30 minutes. HIF1 alpha et HIF1 beta sont constamment produits, mais HIF1 alpha est très labile à l'oxygène, de sorte qu'en conditions aérobies, il est dégradé. Lorsque la cellule devient hypoxique, HIF1 alpha persiste et le complexe HIF1alpha/beta stimule la libération de VEGF. L'utilisation combinée de microvésicules et de 5-FU a entraîné une sensibilité accrue des cellules de carcinome épidermoïde aux agents chimiothérapeutiques, plus que l'utilisation de 5-FU ou de microvésicules seuls. De plus, la diminution de l'expression du gène VEGF était associée à une diminution de l'expression du gène CD1.
### Query ###
Mais pourquoi le site d'épissage proximal fait du VEGF pro-angiogénique et le distal anti-angiogénique, c'est quoi qui cause cette différence ?

### Main Text ###
Isoforms

There are multiple isoforms of VEGF-A that result from alternative splicing of mRNA from a single, 8- exon VEGFA gene. These are classified into two groups which are referred to according to their terminal exon (exon 8) splice site: the proximal splice site (denoted VEGF) or distal splice site (VEGF b). In addition, alternate splicing of exon 6 and 7 alters their heparin -binding affinity and amino acid number (in humans: VEGF, VEGF b, VEGF, VEGF, VEGF b, VEGF, VEGF; the rodent orthologs of these proteins contain one fewer amino acids). These domains have important functional consequences for the VEGF splice variants, as the terminal (exon 8) splice site determines whether the proteins are pro-angiogenic (proximal splice site, expressed during angiogenesis) or anti-angiogenic (distal splice site, expressed in normal tissues). In addition, inclusion or exclusion of exons 6 and 7 mediate interactions with heparan sulfate proteoglycans (HSPGs) and neuropilin co-receptors on the cell surface, enhancing their ability to bind and activate the VEGF receptors (VEGFRs). Recently, VEGF-C has been shown to be an important inducer of neurogenesis in the murine subventricular zone, without exerting angiogenic effects.

### Supplementary Text ###
La production de VEGF-A peut être induite dans une cellule qui ne reçoit pas suffisamment d'oxygène. Lorsqu'une cellule est déficiente en oxygène, elle produit HIF, facteur d'induction de l'hypoxie, un facteur de transcription. HIF stimule la libération de VEGF-A, entre autres fonctions (notamment la modulation de l'érythropoïèse). Le VEGF-A circulant se lie ensuite aux récepteurs VEGF sur les cellules endothéliales, déclenchant une voie de kinase tyrosine menant à l'angiogenèse. L'expression de l'angiopoïétine-2 en l'absence de VEGF conduit à la mort des cellules endothéliales et à la régression vasculaire. Inversement, une étude allemande menée in vivo a révélé que les concentrations de VEGF diminuaient en fait après une réduction de 25 % de l'apport d'oxygène pendant 30 minutes. HIF1 alpha et HIF1 beta sont constamment produits, mais HIF1 alpha est très labile à l'oxygène, de sorte qu'en conditions aérobies, il est dégradé. Lorsque la cellule devient hypoxique, HIF1 alpha persiste et le complexe HIF1alpha/beta stimule la libération de VEGF. L'utilisation combinée de microvésicules et de 5-FU a entraîné une sensibilité accrue des cellules de carcinome épidermoïde aux agents chimiothérapeutiques, plus que l'utilisation de 5-FU ou de microvésicules seuls. De plus, la diminution de l'expression du gène VEGF était associée à une diminution de l'expression du gène CD1.

### Draft ###

### 1. Query Parsing

"Mais pourquoi le site d'épissage proximal fait du VEGF pro-angiogénique et le distal anti-angiogénique, c'est quoi qui cause cette différence ?"

→ User asking mechanism behind proximal/distal splicing sites → pro-angiogenic vs anti-angiogenic VEGF isoforms
→ "site d'épissage" = splicing site (French biomedical terminology)
→ VEGF = vascular endothelial growth factor

Translation issues: "épissage" = splicing, "pro-angiogénique" = pro-angiogenic ●

### 2. Domain Contextualization 

Cell biology/molecular biology domain ●
- Alternative splicing mechanisms
- VEGF family biology 
- Angiogenesis regulation
- Developmental biology (spatial expression patterns)

Geographic: Universal biology principles
Timeframe: Established knowledge (~20+ years of VEGF research)
Language: Technical French → English biomedical concepts

### 3. Information State Assessment

Core mechanism: ●
- Proximal site → shorter isoforms → pro-angiogenic
- Distal site → longer isoforms → anti-angiogenic  
- Exon 8 determines functional difference

Supporting details: ◐
- Heparin binding variants (not primary question)
- Developmental expression patterns
- Tissue-specific regulation

### 4. Biological Mechanism Analysis

Key insight: C-terminal domain determines function ●

Proximal exon 8 → shorter C-terminus → active signaling
Distal exon 8 → longer C-terminus → inhibitory/antagonistic

Additional factors:
- Heparin sulfate proteoglycan binding (proximal favored)
- Neuropilin co-receptor interactions
- Receptor binding affinity differences

### 5. Knowledge Limitations

⚠ Missing specific regulatory mechanisms
? Transcription factors controlling site selection?
? Developmental timing of switch?
? Tissue-specific promoter usage?

∴ Core mechanism well-established, regulatory details incomplete

### 6. Physical/Logical Constraints

Alternative splicing must generate functional variants → ✓
C-terminal domains likely critical → ✓  
Tissue specificity requires differential regulation → ✓

### 7. Response Construction Strategy

Start with: Proximal site = pro-angiogenic, distal = anti-angiogenic ●
Explain: C-terminal exon 8 determines function ●
Acknowledge: Complex regulatory mechanisms beyond scope ◐
Avoid: Over-speculation on unknown mechanisms

### 8. Final Synthesis

⟨H≈0.3⟩ The splicing sites create fundamentally different protein ends - like different tools from same handle. Proximal gives you the screwdriver, distal gives you the hammer. Both work on blood vessel growth but opposite directions. The exact machinery that decides which site to use? That's the regulatory orchestra I'm not quite ready to conduct.

Key message: Structural difference (exon 8) → functional difference ●
Limitation: Regulatory mechanisms incompletely understood ◐

### Answer###
La différence entre les sites d'épissage proximal et distal du VEGF-A réside dans leur exon 8 terminal, qui détermine si les protéines résultantes sont pro-angiogéniques (site proximal, exprimé pendant l'angiogenèse) ou anti-angiogéniques (site distal, exprimé dans les tissus normaux).

Les variants d'épissage du VEGF-A sont classés selon ce site de splice terminal : le site d'épissage proximal produit des protéines pro-angiogéniques, tandis que le site d'épissage distal génère des protéines anti-angiogéniques. Cette différence structurelle a des conséquences fonctionnelles importantes pour l'activité biologique du VEGF.

En plus de cette détermination pro-versus-anti-angiogénique, l'inclusion ou l'exclusion d'exons 6 et 7 modifie l'affinité de liaison à l'héparine et les interactions avec les protéoglycanes sulfatés de l'héparine et les co-récepteurs neuropiline, ce qui influence leur capacité à se lier et à activer les récepteurs VEGF.

Concernant les mécanismes régulateurs spécifiques qui contrôlent l'utilisation de ces sites d'épissage et les facteurs qui en déterminent l'expression spatio-temporelle, il s'agit d'une question complexe sur laquelle je ne peux pas fournir de détails précis.