Quelle méthode a été utilisée pour déterminer la masse de l'hémoglobine, celle de Engelhart ou celle d'Adair ?
Research history

In 1825, Johann Friedrich Engelhart discovered that the ratio of iron to protein is identical in the hemoglobins of several species. From the known atomic mass of iron, he calculated the molecular mass of hemoglobin to n × 16000 (n =number of iron atoms per hemoglobin molecule, now known to be 4), the first determination of a protein's molecular mass. This "hasty conclusion" drew ridicule from colleagues who could not believe that any molecule could be so large. However, Gilbert Smithson Adair confirmed Engelhart's results in 1925 by measuring the osmotic pressure of hemoglobin solutions.

Although blood had been known to carry oxygen since at least 1794, the oxygen-carrying property of hemoglobin was described by Hünefeld in 1840. In 1851, German physiologist Otto Funke published a series of articles in which he described growing hemoglobin crystals by successively diluting red blood cells with a solvent such as pure water, alcohol or ether, followed by slow evaporation of the solvent from the resulting protein solution. Hemoglobin's reversible oxygenation was described a few years later by Felix Hoppe-Seyler.

With the development of X-ray crystallography, it became possible to sequence protein structures. In 1959, Max Perutz determined the molecular structure of hemoglobin. For this work he shared the 1962 Nobel Prize in Chemistry with John Kendrew, who sequenced the globular protein myoglobin.

The role of hemoglobin in the blood was elucidated by French physiologist Claude Bernard.

The name hemoglobin (or haemoglobin) is derived from the words heme (or haem) and globin, reflecting the fact that each subunit of hemoglobin is a globular protein with an embedded heme group. Each heme group contains one iron atom, that can bind one oxygen molecule through ion-induced dipole forces. The most common type of hemoglobin in mammals contains four such subunits.
Recherches historiques

En 1825, Johann Friedrich Engelhart a découvert que le rapport entre le fer et les protéines était identique dans les hémoglobines de plusieurs espèces. À partir de la masse atomique connue du fer, il a calculé la masse moléculaire de l'hémoglobine à n × 16000 (n = nombre d'atomes de fer par molécule d'hémoglobine, maintenant connu pour être 4), la première détermination de la masse moléculaire d'une protéine. Cette "conclusion hâtive" a suscité la moquerie de ses collègues qui ne pouvaient croire qu'une molécule puisse être si grande. Cependant, Gilbert Smithson Adair a confirmé les résultats d'Engelhart en 1925 en mesurant la pression osmotique des solutions d'hémoglobine.

Bien que l'on sache depuis au moins 1794 que le sang transporte l'oxygène, la propriété de transport de l'oxygène de l'hémoglobine a été décrite par Hünefeld en 1840. En 1851, le physiologiste allemand Otto Funke a publié une série d'articles dans lesquels il décrivait la croissance de cristaux d'hémoglobine en diluant successivement des globules rouges avec un solvant tel que de l'eau pure, de l'alcool ou de l'éther, suivie d'une évaporation lente du solvant de la solution protéique résultante. L'oxygénation réversible de l'hémoglobine a été décrite quelques années plus tard par Felix Hoppe-Seyler.

Avec le développement de la cristallographie aux rayons X, il est devenu possible de séquencer les structures protéiques. En 1959, Max Perutz a déterminé la structure moléculaire de l'hémoglobine. Pour ce travail, il a partagé le prix Nobel de chimie 1962 avec John Kendrew, qui avait séquencé la protéine globulaire myoglobine.

Le rôle de l'hémoglobine dans le sang a été élucidé par le physiologiste français Claude Bernard.

Le nom hémoglobine (ou hématoglobine) est dérivé des mots hème (ou hématine) et globine, reflétant le fait que chaque sous-unité de l'hémoglobine est une protéine globulaire avec un groupe hème intégré. Chaque groupe hème contient un atome de fer, qui peut se lier à une molécule d'oxygène par des forces dipolaires induites par les ions. Le type d'hémoglobine le plus courant chez les mammifères contient quatre telles sous-unités.
### Query ###
Quelle méthode a été utilisée pour déterminer la masse de l'hémoglobine, celle de Engelhart ou celle d'Adair ?

### Main Text ###
Research history

In 1825, Johann Friedrich Engelhart discovered that the ratio of iron to protein is identical in the hemoglobins of several species. From the known atomic mass of iron, he calculated the molecular mass of hemoglobin to n × 16000 (n =number of iron atoms per hemoglobin molecule, now known to be 4), the first determination of a protein's molecular mass. This "hasty conclusion" drew ridicule from colleagues who could not believe that any molecule could be so large. However, Gilbert Smithson Adair confirmed Engelhart's results in 1925 by measuring the osmotic pressure of hemoglobin solutions.

Although blood had been known to carry oxygen since at least 1794, the oxygen-carrying property of hemoglobin was described by Hünefeld in 1840. In 1851, German physiologist Otto Funke published a series of articles in which he described growing hemoglobin crystals by successively diluting red blood cells with a solvent such as pure water, alcohol or ether, followed by slow evaporation of the solvent from the resulting protein solution. Hemoglobin's reversible oxygenation was described a few years later by Felix Hoppe-Seyler.

With the development of X-ray crystallography, it became possible to sequence protein structures. In 1959, Max Perutz determined the molecular structure of hemoglobin. For this work he shared the 1962 Nobel Prize in Chemistry with John Kendrew, who sequenced the globular protein myoglobin.

The role of hemoglobin in the blood was elucidated by French physiologist Claude Bernard.

The name hemoglobin (or haemoglobin) is derived from the words heme (or haem) and globin, reflecting the fact that each subunit of hemoglobin is a globular protein with an embedded heme group. Each heme group contains one iron atom, that can bind one oxygen molecule through ion-induced dipole forces. The most common type of hemoglobin in mammals contains four such subunits.

### Supplementary Text ###
Recherches historiques

En 1825, Johann Friedrich Engelhart a découvert que le rapport entre le fer et les protéines était identique dans les hémoglobines de plusieurs espèces. À partir de la masse atomique connue du fer, il a calculé la masse moléculaire de l'hémoglobine à n × 16000 (n = nombre d'atomes de fer par molécule d'hémoglobine, maintenant connu pour être 4), la première détermination de la masse moléculaire d'une protéine. Cette "conclusion hâtive" a suscité la moquerie de ses collègues qui ne pouvaient croire qu'une molécule puisse être si grande. Cependant, Gilbert Smithson Adair a confirmé les résultats d'Engelhart en 1925 en mesurant la pression osmotique des solutions d'hémoglobine.

Bien que l'on sache depuis au moins 1794 que le sang transporte l'oxygène, la propriété de transport de l'oxygène de l'hémoglobine a été décrite par Hünefeld en 1840. En 1851, le physiologiste allemand Otto Funke a publié une série d'articles dans lesquels il décrivait la croissance de cristaux d'hémoglobine en diluant successivement des globules rouges avec un solvant tel que de l'eau pure, de l'alcool ou de l'éther, suivie d'une évaporation lente du solvant de la solution protéique résultante. L'oxygénation réversible de l'hémoglobine a été décrite quelques années plus tard par Felix Hoppe-Seyler.

Avec le développement de la cristallographie aux rayons X, il est devenu possible de séquencer les structures protéiques. En 1959, Max Perutz a déterminé la structure moléculaire de l'hémoglobine. Pour ce travail, il a partagé le prix Nobel de chimie 1962 avec John Kendrew, qui avait séquencé la protéine globulaire myoglobine.

Le rôle de l'hémoglobine dans le sang a été élucidé par le physiologiste français Claude Bernard.

Le nom hémoglobine (ou hématoglobine) est dérivé des mots hème (ou hématine) et globine, reflétant le fait que chaque sous-unité de l'hémoglobine est une protéine globulaire avec un groupe hème intégré. Chaque groupe hème contient un atome de fer, qui peut se lier à une molécule d'oxygène par des forces dipolaires induites par les ions. Le type d'hémoglobine le plus courant chez les mammifères contient quatre telles sous-unités.

### Draft ###

### 1. Query Parsing

"Quelle méthode... masse de l'hémoglobine, celle d'Engelhart ou celle d'Adair?"

→ Comparative historical question. Two names, single target (hemoglobin mass determination).
→ "Ou" = exclusive OR. User wants definitive one.
→ Scientific accuracy critical.

Key constraint: Only one method can be correct for the historical record.

### 2. Information Retrieval Challenge

◐ Engelhart (1825): Iron:protein ratio, molecular weight calculations
◐ Adair (1925): Osmotic pressure measurements, independent confirmation

Temporal gap: 100 years. Methodological independence crucial.

? Which method historically valid?
? Did Adair actually confirm Engelhart's work?

### 3. Historical Context Triangulation

⟨H≈0.3⟩ Hemoglobin structure known ~1840s. But quantitative mass determination? Early 19th century analytical chemistry limited. Iron content measurable, but protein molecular weights... massive molecules, impossible? Academic skepticism reasonable.

⟨H≈0.8⟩ Engelhart's approach: stoichiometric ratios from blood samples, iron analysis. Simple but bold. 16,000 daltons per iron atom → 64,000 Da for tetramer. But how verify? No mass spectrometry yet. Pure speculation? Or real insight?

Adair's century-later confirmation: osmotic pressure = molecular weight via Boltzmann distribution. Independent experimental validation.

### 4. Logical Resolution

∴ Both methods used. But sequential, not competitive.

Engelhart (1825): First calculation, theoretical framework
Adair (1925): Experimental confirmation, century later

! Key insight: Adair confirmed Engelhart, didn't replace him.

Timeline verification:
- Engelhart → initial theoretical determination
- 100-year gap → technological impossibility of verification
- Adair → independent experimental confirmation

### 5. Answer Synthesis

Neither method alone. Sequential application:

Engelhart method: ● Iron:protein stoichiometry → calculated molecular weight
Adair method: ● Osmotic pressure measurements → experimental confirmation

Answer: **Engelhart** for initial determination, **Adair** for confirmation.

The 1925 Adair work validated the 1825 Engelhart calculations after century of technological limitations prevented experimental verification.

NB: User gets both methods in answer, resolves apparent contradiction through temporal/methodological sequencing.

### Answer###
Les deux méthodes ont été utilisées, mais à des moments différents et par des chercheurs différents. Johann Friedrich Engelhart a initialement déterminé la masse moléculaire de l'hémoglobine en 1825 en mesurant le rapport fer-protéine dans plusieurs espèces et en utilisant la masse atomique connue du fer pour calculer une masse moléculaire de n × 16000, où n représente le nombre d'atomes de fer par molécule d'hémoglobine. Cette approche était basée sur des calculs théoriques.

Gilbert Smithson Adair a confirmé les résultats d'Engelhart en 1925, mais il l'a fait en utilisant une méthode complètement différente : la mesure de la pression osmotique des solutions d'hémoglobine. Contrairement à Engelhart qui s'était basé sur des relations stœchiométriques, Adair a employé une technique expérimentale directe pour valider les calculs antérieurs.

Il semble donc que l'œuvre d'Engelhart soit historiquement la première détermination de la masse moléculaire de l'hémoglobine, tandis que celle d'Adair constitue une confirmation expérimentale indépendante réalisée un siècle plus tard.